论文总字数：18752字

摘 要

Hh信号通路作为一条传统且正在演化中的信号通路, 在自然界和生物体的生长和孕育中都起着十分重要的调节作用，而且胚胎发育和成体许多组织器官的自我更新与调节也具有重要的作用。如果某些成员的信号通路产生异常如patched（Ptch）蛋白的缺陷或变异，smoothened (Smo)蛋白产生突变，Gli蛋白的异常增殖或蛋白的稳定性的增加，最终导致Hh信号通路的异常活化，并诱发肿瘤包括肝脏癌、神经胶质瘤、基底细胞癌、黑色素瘤等多发性疾病。因此，阻断Hh通路的异常激活对于人类在癌症的治疗方面是又一个重大的发现。

就当前而言以Hh通路的差异部分作为研究重点得到的阻断Hh通路异常激活的多种抑制药物中，以Hh信号通路上游成员为重点而开发出的治疗药物数目至多。在今后的研究中，也应该更加注重开发以Hh信号通路下游为靶点的有效抗癌药物。

关键词：Hedgehog信号通路；肿瘤；抑制剂

Hedgehog small molecule inhibitors LDE225 derivatives of preclinical pharmacological research

Abstract

Hh signaling pathway as a traditional and signaling pathways in evolution, and the growth of organisms in nature and inoculation of plays a very important role in regulating, and many embryonic development and adult tissues and organs of self-renewal and regulation also plays an important role. If some members resulting from a signal path such as patched (Ptch) protein of defects or mutations and smoothened (Smo) proteins from mutations, Gli protein or abnormal proliferation of protein stability increased, eventually lead to abnormal activation of Hh signaling pathways, and induce tumor including liver cancer, glioma, basal cell carcinoma, multiple diseases such as melanoma. Therefore, block the abnormal activation of the Hh pathway in cancer treatment for human is another important discovery.

In terms of the current in a different part of the Hh pathway as the research focus of blocking the Hh pathway abnormal activation of a variety of drug, and focusing on the Hh signaling pathway upstream members developed a number of therapeutic drugs at most. In the future research should pay more attention to development targets with Hh signaling pathways downstream of effective anti-cancer drugs.

Keywords: Hedgehog signaling pathway;Tumor；inhibitor

目 录

摘要 I

Abstract II

第一章 引言 1

1.1 研究背景 1

1.2 Hh信号的概述 1

1.2.1 Hh信号通路的简述 1

1.2.2 Hh信号通路的组成 2

1.3 Hh信号与肿瘤的概述 3

1.3.1 Hh信号通路与肿瘤的关系 3

1.3.2 Hh 信号通路在肿瘤中异常激活的方式 4

1.3.3 Hh 信号通路与肿瘤的侵袭和转移 5

1.4 总结与展望 5

1.5 本文研究内容 5

第二章 荧光素酶报告基因检测Gli活性，测得化合物IC50 6

2.1 实验原理 7

2.2 实验方法 7

2.3 实验仪器与药品 8

2.4实验步骤 8

2.5实验结果 9

2.6 实验结论 10

第三章 MTT法检测化合物对几种肿瘤细胞的抑制作用 11

3.1实验原理 11

3.2MTT的配制 11

3.3实验仪器与药品 11

3.4实验步骤 12

3.4.1 贴壁细胞 12

3.4.2 悬浮细胞 12

3.5 实验结果 12

3.6 实验结论 14

第四章 论文总结 15

致谢 16

参考文献 17

第一章 引言

1.1研究背景

Hh基因最早在1980年最先由来自德国、美国的发育遗传学家福尔哈德和威斯乔斯在研究果蝇时作为一个“体节极性”基因被发现^[1],这一基因在发生突变以后会致使果蝇胚胎呈现多刺小球状,如同大家看到的刺猬一般,故名“Hedgehog”。然后信号转导途径开始初步建立起了基本模型 ^[2] ,并得到一系列与Hh信号转导与突变具有相关功效的基因联合介入。

由于在生物体中的Hh信号通路有非常高的守旧性，不久之后也建立起了有关生物体中Hh信号转导途径模型。但哺乳动物中细胞信号通路是相对复杂的，主要原因有三: (1) 在哺乳动物中许多的单基因成员是以一个基因家族形式存在,而哺乳动物中主要有3个成员，分别是Sonic hedgehog (SHH)、Desert hedgehog (DHH)和Indian hedgehog (IHH)；跨膜蛋白 Patched (Ptch) 在自然界的生物体中有2个成员，分别为Patched1 (Ptch1)和 Patched2 (Ptch2)，而转录因子Ci在哺乳动物中为Gli1、Gli2和Gli3。(2) 一些成员在果蝇的Hh信号途径在哺乳动物中没有显著的序列和功能的对应。相反，Hh信号通路在哺乳动物中的某些成员如融合阻抑蛋白SUFU，在功能上与果蝇中的同源物也存在很大差异。(3)在生物体中，Hh通路的转导过程取决于一种特殊的细胞器——初级纤毛。

Hh信号通路在人类的多种生理过程和胚胎的生长发育中都起着非常关键性的作用，例如维持人体机内环境稳定和胚胎的生长分化等，且其在肿瘤细胞的生长和发展过程中的作用也变得越来越明朗化。研究发现，多种消化道肿瘤，脊髓胶质瘤，肺癌和其他的肿瘤细胞中有Hh信号通路的异常激活，且与细胞的生长，侵袭转移，增殖分化等多方面都有密切的联系，这一研究结果向人们展示了Hh信号通路的异常激活对肿瘤细胞的发展和增殖都起到十分关键的作用。所以，在正常的情况下Hh信号通路的异常能够阻断细胞的传导以防止肿瘤，为人类肿瘤的治疗提供一个新的方法^［3］ 。

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