论文总字数：15407字

摘 要

黄曲霉毒素 B₁(AFB₁)是由黄曲霉和寄生曲霉产生的次级代谢产物，是一种具有致癌、致畸、致突变且毒性极强的化合物。AFB₁常存在于发霉的花生中，导致花生油中的AFB₁残留量大，对人体健康造成严重威胁。本研究利用碱炼法去除花生油中的AFB₁，利用Box-Behnken响应面法优化花生油碱炼脱毒工艺，并通过HepG₂细胞毒性实验对脱毒后的花生油进行安全性评价。实验结果得出: 最佳脱毒工艺为：碱液浓度 23.1 %，超碱用量 0.3 %，碱炼初温 43.33 ℃，碱炼终温 76.86 ℃。此条件下 AFB₁ 从 34.78 μg/kg 降低到 0.41 μg/kg，远低于国家标准20 μg/kg（GB 1534-2003）。碱炼处理后的花生油与未处理阳性对照相比，HepG₂细胞活性显著提高，达到 95.45%，与空白对照相比无显著差异(Pgt;0.05)。

关键词：花生油，黄曲霉毒素 B₁（AFB₁），碱炼，响应面法，安全性评价

Abstract：Aflatoxin B₁(AFB₁) is a toxic metabolite mainly produced by the fungal strains Aspergillus flavus and Aspergillus parasiticus. It is a potent teratogen, mutagen, hepat ocarcinogen and highly toxic. It is often found in moldy peanuts.Therefore, the residue of aflatoxin B₁ in peanut oil is harmful to human health. In this study, AFB₁ was removed from peanut oil by alkali refining; the detoxification process of AFB₁ in peanut oil with alkali refining were optimized by the Box-Behnken response surface methodology. In addition, the safety of peanut oil after being alkali refined was evaluated by HepG₂ cytotoxicity assay. The results showed that the optimum detoxification process were : alkali concentration of 23.1 %, excess alkali of 0.3 %,initial temperature of 43.33 ℃ and final temperature of 76.86 ℃.Under these conditions, the concentration of AFB₁ was degrade from 34.78 μg / kg to 0.41 μg/kg ,which was far below national standards of 20 μg /kg (GB 1534-2003). In point of peanut oil contaminated AFB₁ after being alkali compared with the positive control , the activity of HepG₂ cells reached to 95.45 %, which was insignificant differences compared with that of negative control.

Keywords：Peanut Oil, Aflatoxin B₁(AFB₁), Alkali refining,Response surface method, Safety evaluation

目录

1 前言 3

1.1 黄曲霉毒素及其危害 3

1.1.1 黄曲霉毒素概述 3

1.1.2 黄曲霉毒素的危害 3

1.2 花生油中黄曲霉毒素的污染及预防 3

1.2.1 花生及花生油中黄曲霉毒素的污染 3

1.2.2 花生油中黄曲霉毒素的预防措施 4

1.3 黄曲霉毒素的去除方法 4

1.3.1 物理法 4

1.3.2 化学法 4

1.3.3 生物法 5

1.4 食品中黄曲霉毒素的限量标准 5

1.5 碱炼法降解黄曲霉毒素的应用及影响因素 6

1.5.1 碱炼介绍 6

1.5.2 影响碱炼的因素 6

1.5.3 碱炼法降解黄曲霉毒素的应用 6

1.6 研究目的和意义 7

2 材料与方法 7

2.1 试验材料 7

2.2 化学试剂 7

2.3 仪器设备 8

2.4 试验方法 8

2.4.1 HPLC测定 AFB₁ 8

2.4.2 碱炼降解花生油中黄曲霉毒素响应面优化试验 9

2.4.3 碱炼脱毒后的花生油安全性评价-HepG₂细胞毒理学试验 9

3 结果与分析 9

3.1 HPLC测定AFB₁ 10

3.1.1 AFB₁的色谱图 10

3.1.2 AFB₁的标准曲线 10

3.2 碱炼降解花生油中黄曲霉毒素响应面优化试验 10

3.3 碱炼脱毒后的花生油安全性评价-HepG₂细胞毒理学实验 13

结论 14

参考文献 15

致谢 17

1 前言

1.1 黄曲霉毒素及其危害

1.1.1 黄曲霉毒素概述

黄曲霉毒素是一种由黄曲霉、寄生曲霉等产毒菌株产生的真菌有毒代谢产物。它首次被人们发现存在于发霉的花生粉中，起源于一家农场的数十万只火鸡死亡，经调查发现火鸡死亡与受产毒真菌污染的花生粉有关，之后人们将其命名为黄曲霉毒素。黄曲霉毒素广泛分布于自然界，受污染最严重的是花生和玉米。

除肉毒素以外，黄曲霉毒素是霉菌中毒性最强的，有着极强的致癌和致畸性，危害人和动物的肝脏组织(廖伯涛等,2003)。相较于其他结构而言，AFB₁毒性最强，致突变、致畸、致癌作用最强。控制和预防黄曲霉毒素污染，减少食品中的黄曲霉毒素含量，从而提高食品安全。

1.1.2 黄曲霉毒素的危害

黄曲霉毒素主要作用于肝脏，容易诱发突变，降低免疫力和致癌。动物中毒的特征是全身开始出血，出现消化系统疾病和神经系统疾病。动物急性中毒的特征是厌食、排泄停止等，甚至会严重损害血管和中枢神经系统，在中毒后数小时至数天内会死亡。早期慢性中毒的特征是食欲不振、体重下降、性能降低等，随之还会出现黄疸，脂肪肝，肝损伤等症状。例如，AFB₁中毒的奶牛会发生消化功能紊乱和流产现象，剖检其肝部后发现肝部硬化甚至坏死的现象（王晓晓等, 2011）。

剩余内容已隐藏，请支付后下载全文，论文总字数：15407字