湿热灭菌柜性能验证

论文总字数：21924字

摘 要

湿热灭菌柜包含蒸汽灭菌柜、过热水灭菌柜，是生产无菌培养基的重要灭菌方法。默*公司蒸汽灭菌柜、过热水灭菌柜已于2019年初完成了初始确认，但是否能够保证生物培养基的无菌效果，尚没有进行验证。本文对在无菌产品生产过程中使用的高压蒸汽灭菌柜和过热水灭菌柜进行周期性的性能验证。将从湿热灭菌原理、验证策略、现场验证方法、方法优化、数据分析五个步骤进行对高压蒸汽灭菌柜和过热水灭菌柜的性能验证，探索其是否可以满足无菌生物培养基的生产要求，为企业生产工艺选择提供依据，以促进生命科学研究事业的进步。

关键词：湿热灭菌法原理；验证策略；现场验证方法；方法优化；数据分析

Validation of Moist-Heat Sterilizer Performance

Abstract

Moist-heat sterilization cabinet includes steam sterilization cabinet and hot-water sterilization cabinet, which is an important sterilization method for producing sterile culture medium. The steam sterilization cabinet and hot-water sterilization cabinet of Merlin * Company have been initially confirmed in early 2019, but whether they can ensure the aseptic effect of biological culture medium has not been verified.In this paper, the periodic performance verification of high pressure steam sterilizing cabinet and hot-water sterilization cabinet used in the actual production process is carried out to explore whether it can meet the production requirements of aseptic biological medium. The performance verification of the high pressure steam sterilization cabinet and the hot- water sterilization cabinet will be carried out from five steps：the principle of moist heat sterilization, the verification strategy, the field verification method, the method optimization and the data analysis, to explore whether it can meet the production requirements of sterile biological culture medium and provide basis for enterprise production process selection, so as to promote the progress of life science research.

Keywords: Principle of Moist-Heat Sterilization Method, Verification Strategy, Field Verification Method, Method Optimization, Data Analysis

目 录

摘 要 Ⅰ

Abstract Ⅱ

第一章 引 言 1

1.1 湿热灭菌法定义 1

1.2 湿热灭菌影响因素 1

1.2.1灭菌物中微生物的种类和数量 1

1.2.2 灭菌溶液的pH值 1

1.2.3 灭菌物的性质 1

1.2.4蒸汽的饱和度 1

1.3 湿热灭菌程序 1

1.3.1脉动真空灭菌程序 2

1.3.2混合蒸汽-空气（SAM）灭菌程序 2

1.3.3过热水灭菌程序 2

1.4 研究内容及意义 2

第二章 验证策略 4

2.1 高压蒸汽灭菌柜验证策略 4

2.1.1 F0值/灭菌温度/时间 4

2.1.2 生物指示剂挑战 4

2.1.3 装载方式 4

2.1.4 BD测试 6

2.1.5 热分布验证 6

2.1.6 热穿透/生物指示剂挑战探头布点 7

2.2 过热水浴灭菌验证策略 10

2.2.1 F0值/灭菌温度 10

2.2.2 生物指示剂挑战测试 10

2.2.3 温度探头及BI布点原则 10

2.2.4 装载方式/热穿透探头布点方法 11

2.3 本章小结 15

第三章 现场验证与数据分析 16

3.1 验证准备 16

3.1.1 人员确认 16

3.1.2 文件确认 16

3.1.3 仪器仪表确认 16

3.2 验证执行 16

3.2.1 过热水灭菌柜现场验证 16

3.2.2 高压蒸汽灭菌柜现场验证 17

3.3 灭菌温度和时间数据分析 18

3.4 生物指示剂培养结果分析 20

3.5 数据分析结果 20

3.6 本章小结 22

第四章 验证优化 23

4.1 水浴灭菌柜验证优化 23

4.2 高压蒸汽灭菌柜验证优化 25

4.3 本章小结 28

第五章 总结和展望 29

5.1 总结 29

5.2 展望 29

致 谢 30

参考文献 31

第一章 引 言

1.1 湿热灭菌法定义

湿热灭菌法指将物品置于灭菌柜内利用高压饱和蒸汽、过热水喷淋等手段使微生物菌体中的蛋白质、核酸发生变性而杀灭微生物的方法。这种变性首先是分子中的氢键分裂，当氢键断裂时，蛋白质及核酸内部结构被破坏，进而丧失了原有功能。蛋白质及核酸的这种变性可以是可逆的，也可以是不可逆的。虽然微生物功能性结构被破坏，若氢键破裂的数量未达到微生物死亡的临界值，则其分子很可能回复到它原有的形式，微生物就没有被杀死。为有效地使蛋白质变性，如采用高压蒸汽灭菌时，就需要水蒸汽有足够的温度和持续时间，这对灭菌效果十分重要。高温饱和水蒸汽可迅速使蛋白质变性，在规定操作条件下，蛋白质发生变性的过程即微生物死亡的过程，是可预见和重复的。

该方法灭菌能力强，为灭菌中最有效、应用最广泛的灭菌方法。药品、容器、培养基、无菌衣、胶塞以及其它遇高温和潮湿不发生变化或损坏的物品，均可用本法灭菌。流通蒸汽不能完全杀灭细菌孢子，一般可作为不耐热无菌产品的辅助灭菌手段。

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