天然花中的黄酮类化合物的同时测定方法研究

论文总字数：11981字

摘 要

本文创建了用高效液相色谱法同时测定植物花中的芦丁、槲皮素、儿茶素和橙皮素四种黄酮类化合物的方法。采用乙醇作为提取剂，超声波提取法对迎春花、枇杷花、桂花、野菊花和腊梅花进行黄酮类化合物的提取，并用建立的方法对研究花中的四种黄酮类化合物进行了同时测定。对研究的方法考察显示，用C₁₈柱作为色谱柱，在甲醇-磷酸水溶液(45:55)的流动相下，芦丁、槲皮素、儿茶素和橙皮素分别在0.076~0.38μg(R²=0.9999)、0.064~0.32μg(R²=0.9994)、0.056~0.28μg(R²=0.9996)、0.056~0.28μg(R²=0.9999)内峰面积和进样量呈良好的线性关系，相对标准偏差RSD分别为：1.18%、1.12%、0.79%、1.35%；通过标准加入法得到迎春花提取液中芦丁、槲皮素、儿茶素、橙皮素的平均回收率分别为92.00%(RSD=1.36%)、103.53%(RSD=1.62%)、98.22%(RSD=1.90%)、92.47%(RSD=0.99%)。上述结果标明，本文建立的方法具有较好的精密度与重现性和准确性，可以将四种黄酮类化合物分离。

关键词：五种花，黄酮类化合物，HPLC，同时测定

Abstract: This paper has established a method for determination of four kinds of flavonoids, rutin, quercetin, catechins and hesperidin in plant flowers at the same time by high performance liquid chromatography(HPLC). The flavonoids were extracted using ethanol under the ultrasonic condition from the flower of Jasminum nudiflorum, Eriobotrya japonica, Osmanthus fragrans, wild chrysanthemum, Chimonanthus praecox and these were measured by using the method established. The results showed that linear relationship of the peak area and the quantity of rutin, quercetin, catechins and hesperidin were 0.076 ~ 0.38μg(R² = 0.9999), 0.064 ~ 0.32 μg(R² = 0.9994), 0.056 ~ 0.28μg(R² = 0.9996), 0.056 ~ 0.28μg(R² = 0.9999)respectively by using C₁₈ column and under the mobile phase in the methanol - phosphoric acid aqueous solution (45:55), the relative standard deviation RSD were 1.18%, 1.12%, 0.79%, 1.12% respectively; the average recovery rate of the four kinds of flavonoids were 92.00%(RSD = 1.36%), 1.36%(RSD = 1.62%), 98.22%(RSD = 1.90%), 1.90%(RSD = 0.99%)by added standard four kinds of flavonoids in the extract of Jasminum nudiflorum. The above results indicated that the established method can separate the research of four kinds of flavonoids and has good precision, reproducibility and accuracy.

Keywords: five kinds of flowers，flavonoids compounds，HPLC，simultaneous determination

目 录

1 引言 2

2 实验部分 3

2.1 材料、仪器与试剂 3

2.2 紫外波长的确定 4

2.3 色谱条件 4

2.4 黄酮类化合物的提取 4

2.5 标准溶液的配制 4

2.6 标准样品的HPLC测定 5

2.7 线性关系考察 5

2.8 精密度考察 6

2.9 重现性考察 6

2.10 样品含量的测定 6

2.11 回收率试验 7

3 结果与讨论 7

3.1 紫外波长的选择结果 7

3.2 标准样品HPLC实验结果 7

3.3 标准曲线的确定 9

3.4 精密度考察结果 9

3.5 重现性考察结果 10

3.6 样品含量测定结果 10

3.7 回收率实验结果 12

结 论 14

参 考 文 献 15

致 谢 16

1 引言

迎春花(Jasminum nudiflorum Lind.l)为木樨科茉莉属落叶灌木，原产于中国的中部和北部各省份，而现分布于中国各地。迎春花有野生的和栽培的两种，它的花和叶经常被用来做草药。迎春花的花和叶中含有迎春花苷和迎春花苦味质等成分，所以使迎春花性平、无毒、味苦，并有解热发汗、利尿、活血解毒、消肿止痛等功效^[1-2]。

枇杷花为蔷薇科琵琶属植物琵琶Eriobotrya japonica(Thunb.)Lindl.在中国江苏、浙江、广西、四川等地有大规模种植。枇杷花味淡、微温，主要可以治疗鼻流清涕、感冒咳嗽、枯痨久咳、痰中带黑血^[3]等。

桂花(Osmanthus fragrans)亦称岩桂、九里香、木犀，属木犀科(Oleaceae)木犀属(Osmanthus)，是中国特有的常绿阔叶灌木，迄今为止已经有2500 多年的栽培史。是我国十大传统名花之一。桂花除了具有很高的观赏价值以外，还是一种集药用、食用、香料等多种用途于一身的经济作物。桂花的根、花和果实都可以作为药治病，性温、味辛、无毒，具有化痰止咳、咳喘痰多、经闭腹痛、虚寒胃痛等功能。在世界上被誉为“全营养食品”^[4]。

野菊花为菊科植物野菊(chrysanthemum indicum L)的干燥头状花序，又称为疟疾草、苦薏、山菊花等^[5]。具有清热静心明目、消肿止痛、疏风平肝的功效，在我国民间有悠久的药用历史，中国药典也早有记载。现代药理证明: 野菊花具有抗病毒、降血压、增加冠脉血流量、清除氧自由基等作用。野菊花生物活性多样、清香宜人、安全可靠，同时药源广、价格低廉，值得在药品、食品、保健品、化妆品等多领域开发价值。

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