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摘 要

关键词：茄科作物，青枯菌T13，抗病。

Abstract： Great influence on bacterial wilt of Solanaceous crops yield. Plants in the onset of flowering period, and will cause the death of the whole plant plant, resulting in production even crops; the results after onset, the loss amounted to more than 60% ~ 70%.The experiment of "Xiang yin 79 - 1", tomato 2, “hong fan 1.2”, "5.24", "da huang pi", "qiang li mi shou" “qiang feng”, Xi powder No. 3 of inoculating Ralstonia solanacearum T13.To observe the growth of the seedlings after inoculation.Results showed that the "da huang pi", "qiang li mi shou", "qiang feng", Xi powder 3 first leaf wilt Yan and dead, "5.24" also appeared slight wilting, "Xiang yin 79 - 1, tomato 2, Hong Fan 1.2 normal growth. Description on the market "xiang yin 79 - 1, tomato No. two, No. 1.2 Hong Fan of the three tomato varieties with resistance to bacterial wilt resistance.

Keywords：Solanaceae，Ralstonia solanacearum T13，disease-resistant

目 录

1 前言 4

2 材料与方法 5

2.1 试验材料 5

2.2 试验方法 5

2.2.1 目的菌液的获取 5

2.2.2 茄科作物的栽培 5

2.2.3 茄科劳尔氏菌接种 5

2.2.4 观察茄科作物接种后情况 6

3 结果 7

讨论 9

参考文献 10

致谢 11

1 前言

青枯病是番茄上常见的维管束系统性病害之一，发生普遍，保护地、露地均可发生。 南方及多雨年份，发生普遍而严重。发病严重时，植株青枯死亡，导致严重减产，甚至绝收^[1]。在结果之后发病的，损失达60%以上。番茄青枯病病菌主要在土壤及病残株或肥料内越冬。 翌年在番茄生长季节，尤其是在开花期，病菌可借流水、人畜和农具等传播，多从番茄根部伤口侵入和繁殖，逐步扩展到维管束，随着输导组织向上蔓延至植株顶端，使病株输导组织受到破坏，水分、养分供不应求，致使植株茎叶枯萎^[2]。

目前的防治方法：轮作嫁接。十字花科或禾本科等作物实行3a的轮作，重病地实行5a轮作^[3]。降低湿度。选择排水优质的无病地块进行育苗和定植。地下水位高或地势低洼的地区采用高畦种植，开好排水沟，让其雨后可以及时把雨水排干。及时进行中耕除草，降低田间的湿度。清除病原。如果在田间发现病株，应该立即拔除并且带出田地进行销毁，清洁田地，并且在拔除的地方撒草木灰或生石灰粉或20%石灰水。药剂防治。施用农用链霉素是目前防治番茄青枯病的措施之一^[4]，当青枯病初显症状，用72%农用硫酸链霉素可溶性粉剂4000倍液，或新植霉素4000倍液灌根，每株灌0.3～0.5升，8～10天灌一次，连灌2～3次。在进行药剂防治的同时，适当喷施一些叶面肥，可以有效促进番茄恢复生长，而少施氮肥，多施有机肥和磷钾肥，也能增强植株的抗病力。

青枯菌的产生多种致病因子包括胞外多糖(EPS I)，多聚半乳糖醛酸酶和内切葡聚糖酶等植物细胞壁降解酶类及生长素、细胞分裂素和乙烯刚等植物激素。对其致病机理的研究主要集中在它的胞外多糖，果胶酶和纤维素酶上。Hussain和Kelman(1958)首次报道了青枯雷尔氏菌发酵液离心后的上清液能够使番茄枝条萎蔫，而缺乏EPSI的自发突变株没有这种现象发生阐。因此认为植物体内的青枯雷尔氏菌分泌的胞外多糖，堵塞导管，阻碍植物的水分运输，从而表现出萎蔫的症状。另外，EPSI还可能掩盖了菌体表面的菌毛和脂多糖等结构，从而使寄主植物的免疫系统无法识别和攻击青枯菌。。此外EPS还可阻止青枯菌菌毛和植物细胞壁结合，从而不能激发寄主的防卫反应，EG能影响病害发展速度^[5]，PG是青枯菌迅速侵入植物根系和体内定殖所必须的^[6]，。遗传学研究也已证明EPS l是青枯菌关键的致病因子^[7]。除此之外，流动性通常被看作是细菌毒性的一种决定因子^[8]。

2 材料与方法

2.1 实验材料

1. “湘引７９－１”、番茄二号、洪番1.2号、“524”，“大黄皮”、“强力米寿”、“强丰”、西粉三号的种子各100粒；
2. 青枯菌T13；
3. 无菌土，无菌水；
4. 培养基：YGPA(每1000ml中：酵母浸膏5克，葡萄糖15克，胰蛋白胨5克，琼脂15克)；
5. 烧杯，量筒，移液枪，无菌培养皿,镊子，接种环，酒精灯，烘箱，恒温震荡培养箱，分光光度计。

2.2 实验方法

2.2.1 目的菌液的获取

取实验室本有的青枯菌T13，用TGPA培养基进行培养。再青枯菌T13划线接种，活化2-3次。然后用接种环移取青枯菌T13至无菌水中，调整加水量，以清水对照，分光光度计测O.D值0.2。

2.2.2 茄科作物的栽培

使用次氯酸钠表面消毒对番茄种子进行处理，将番茄种子浸于3%～4%次氯酸钠溶液中充分震荡20min，以灭菌水充分漂洗种子3～4次。然后在土质肥沃疏松的无菌土壤中进行栽培，各个品种的种子栽培100颗，并且做好标记。直至幼苗长成3～5片真叶苗龄。

2.2.3 青枯菌T13接种

在幼苗3～5片真叶苗龄时，采用注射处理，将获得的适量菌液倒入无菌量筒中，测量出其准确的量，倒入无菌烧杯中，对其进行稀释，得到稀释100倍的菌液，用移液枪量取30微升的稀释液，然后用注射器将30微升青枯菌T13菌液注入植物的根部以上的主茎基部，每个品种接种百分之五十的成活植株，剩余百分之五十的植株作为对照组，对照组则用同样的处理方法，在根部以上的主茎基部注射同等量的无菌水进行处理。

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